SEPIACFPS™
SepiaCFPS™ E. coli Core Kit
(Z0001)
从快速筛选到规模放大。为科研人员提供灵活的无细胞蛋白表达工具，支持多种目标蛋白的表达与研究。
SepiaCFPS™ E. coli Core Kit
- 兼容质粒 DNA 与线性 DNA
- 低投入，高产出
- 支持多种类型蛋白表达
- 产品性价比高
试剂盒详情
选择试剂盒规格
| 试剂盒规格 | 用途 |
| 1 mL | 轻量筛选与试剂盒测试 |
| 5 mL | 高通量筛选测试 |
| 10 mL | 高通量筛选或小规模毫克级放大 |
| 100 mL | 自动化筛选或较大规模毫克级放大 |
| 1000 mL | 自动化筛选、自动化毫克级放大及克级放大 |
试剂盒组分
| 试剂盒规格 | 无细胞提取液 (3.3×) | 无细胞缓冲液 (2.5×) | 对照质粒 (50×) |
|---|---|---|---|
| 1 mL | 1 × 0.3 mL | 1 × 0.4 mL | 1 × 0.025 mL |
| 5 mL | 5 × 0.3 mL | 5 × 0.4 mL | 1 × 0.025 mL |
| 10 mL | 3 × 1 mL | 3 × 1.33 mL | 1 × 0.025 mL |
| 100 mL | 1 × 30 mL | 1 × 40 mL | 1 × 0.025 mL |
| 1000 mL | 10 × 30 mL | 10 × 40 mL | 1 × 0.025 mL |
数据
图 1. SepiaCFPS™ E. coli Core Kit 可在较低 DNA 浓度条件下使用质粒或线性 DNA。测试了不同 DNA 浓度与模板形式；左图显示 29 ℃、10 μL 反应体系中反应 12 小时后的 GFP 终点信号随 DNA 浓度变化，右图显示采用 4 nM 质粒 DNA 或 8 nM 线性 DNA 时的转录（Tx）和翻译（Tl）动力学。
具体实验结果会受到模板设计、反应条件和目标蛋白特性影响，请结合实际项目进行评估。
资源下载
Quick Start Guide (PDF) SepiaCFPS™ Z0001 中文快速入门与首次使用指南。 下载 PDF
Control plasmid sequence (D0001) (GenBank) pS-T7-sfGFP r1 对照质粒的注释序列。 下载 GenBank
Safety Data Sheet (SDS, US) (PDF)Safety, handling, and regulatory information for the kit.
Certificate of Analysis (CoA)
Lot-specific composition and QC release results.
未找到该 Lot 的文件。
Lot QA comparison data
Lot-comparison data and supporting QC outputs.
未找到该 Lot 的文件。
常见问题
SepiaCFPS™ 与其他 CFPS 试剂盒有何不同？
SepiaCFPS™ 提供基因组与缓冲液组成信息、批次级质量控制，以及能够支持从筛选到蛋白规模放大的产品规格与价格选择。
SepiaCFPS™ E. coli Core Kit 可以表达哪些类型的蛋白？
核心试剂盒支持天然或工程化的胞质蛋白。含有两个及以上二硫键或跨膜结构域的蛋白，其表达量可能降低。
核心试剂盒可以表达抗体、纳米抗体、scFv 或 VHH 吗？
核心试剂盒可用于表达 scFv 和 VHH。面向单克隆抗体等更复杂生物制品的优化试剂盒仍在开发中。
预期蛋白表达量是多少？
根据目标蛋白的折叠能力，预期表达量约为 0.1–3 mg/mL；sfGFP 的示例数据可达到约 2 mg/mL。
如何定量表达产率？
在条件允许时，采用荧光素化学标准品，将 sfGFP 产率换算为相对荧光素当量（RFE），方法参考 Priorino 等（2025）。对于纯化蛋白，可结合分子量和消光系数通过 A280 测定浓度，并通过 SDS-PAGE 评估纯度。
试剂盒中包含什么？
每个批次均配有分析证书（CoA），其中列明各组分的组成信息。
SepiaCFPS™ 不同批次之间的一致性如何？
批次级质量控制用于保证可重复性和可追溯性；每个批次都会与前一批次进行比较测试。受无细胞试剂生产特性影响，不同批次不会完全相同。
如果需要完全相同的批次怎么办？
建议一次性购买完整工作流程所需数量，以确保整个项目使用同一批次。
目标蛋白需要糖基化或其他翻译后修饰怎么办？
当前 SepiaCFPS™ E. coli Core Kit 不提供真核糖基化机制。其他翻译后修饰是否适用取决于目标蛋白，需要针对具体项目评估。
如果需要无内毒素产品怎么办？
核心试剂盒可用于规模化表达，之后可进行内毒素去除，但该过程可能造成一定产量损失。
可以使用自己的表达构建，而不使用试剂盒提供的设计吗？
可以。试剂盒提供的构建已通过强启动子与 RBS 组合，并在线性 DNA 两端增加约 100 bp 序列进行无细胞表达优化。自有构建应通过实验验证其性能，表达量可能较低。
我的启动子基于 T7-lacO，仍可使用该试剂盒吗？
支持 T7-lacO 启动子，但需要加入 0.4 mM IPTG，否则系统中的 lacI 会抑制启动子；表达量可能降低。
我的启动子依赖 E. coli RNA 聚合酶，例如 σ70、pTac 或 pLac，仍可使用吗？
不建议。核心试剂盒未针对这些启动子优化，可能需要更高 DNA 浓度；面向此类用途的优化方案仍在开发中。
构建中的线性 DNA 表现不佳，可能是什么原因？
线性 DNA 的稳定性低于质粒 DNA，并会随时间降解。在线性 DNA 的启动子与终止子区域外侧保留约 100 bp 末端序列，有助于提高稳定性并提升反应初期的表达。
该试剂盒适合基因线路原型设计或合成生物学应用吗？
仅建议用于采用 T7 启动子的应用。核心试剂盒通常不适合 σ70 启动子；面向此类场景的优化方案仍在开发中。
试剂盒可以反复冻融吗？
一般可接受冻融。建议在解冻过程中将提取液和缓冲液保持在约 4 ℃；若出现沉淀，请在使用前充分混匀。
试剂盒到货时冰袋已经融化，是否仍可使用？
试剂盒使用冰袋运输。如果到货时提取液与缓冲液仍保持低温，通常可继续使用；收货后请按标签所示温度保存各组分。
